农杆菌od值0.4到0.6多久
时间是很短的,农杆菌OD值在0.5左右时处于对数增长期,细胞数目增长极快,一般侵染时很难做到精确到0.5,0.4道0.6都可以。
如果觉得不放心那就多培养1个小时,千万不能时间久了,细胞老化就不好了。
拓展资料
农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位 ,并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中。因此,农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,然后通过细胞和组织培养技术,再生出转基因植株。
转基因技术的飞速发展为生物定向改良和分子育种提供了一种较佳的方法,并使其成为基因工程和育种的最有效途径,目前应用较广泛的转基因技术有农杆菌介导法、花粉通道法、显微注射法、基因枪法、离子束介导法等等,其中农杆菌介导法以其费用低、拷贝数低、重复性好、基因沉默现象少、转育周期短及能转化较大片段等独特优点而备受科学工作者的青睐。
农杆菌介导法主要以植物的分生组织和生殖器官作为外源基因导入的受体,通过真空渗透法、浸蘸法及注射法等方法使农杆菌与受体材料接触,以完成可遗传细胞的转化,然后利用组织培养的方法培育出转基因植株,并通过抗生素筛选和分子检测鉴定转基因植株后代。
根癌农杆菌的Ti质粒上有一段转移DNA(T-DNA),具有向植物细胞传递外源基因的能力,而细菌本身并不进入受体细胞。农杆菌转化植物细胞涉及一系列复杂的反应,主要包括:农杆菌介导法①受伤的植物细胞为修复创伤部位,释放一些糖类、酚类等信号分子。
农杆菌为什么总是摇不起来?
因为:假阳性或菌株死了或者抗生素浓度太高等。
无抗的话200转28℃摇12h,这时OD可到0.8~1左右。12h之后每1h测量一次OD,直到你所需的OD=1。有抗生素的话摇16小时,然后按上面说的操作。200rpm,28℃。一般摇到OD600=0.6,需要24小时,摇起来以后长得比较快,估计再有2-3个小时就差不多了。
分类
农杆菌主要有两种:根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)和发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)。根癌农杆菌的Ti质粒和发根农杆菌的Ri质粒上有一段T-DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中。因此,农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系,被誉为“自然界最小的遗传工程师”。
以上内容参考:百度百科-农杆菌